校准紫外分光光度计的波长是确保其测量准确性的重要步骤。以下是对波长校准的详细步骤:
一、准备阶段
1、选择合适的标准物质:常用的标准物质有钬玻璃和氧化钕滤光片等。这些标准物质具有已知的吸收峰,可用于波长校准。
2、检查仪器状态:确保光度计处于良好的工作状态,包括光源灯的使用寿命、光学元件的清洁度以及仪器的稳定性等。
3、预热仪器:打开电源开关,预热仪器至少20分钟,使仪器达到稳定的工作状态。
二、校准步骤
1、设置仪器参数:将光度计设置为待测状态,选择合适的光源(如钨灯或氘灯),并设置适当的扫描速度和狭缝宽度。
2、测量标准物质:将选择的标准物质(如钬玻璃)放入样品室,关闭样品室盖。使用数字键输入所需的波长范围(如190-1100nm),并开始测量标准物质的吸收光谱。
3、调整波长:观察测量得到的吸收光谱,与标准物质的已知吸收峰进行比较。如果测量值与标准值存在偏差,需要调整仪器的波长设置,直到测量值与标准值一致。
4、记录数据:记录校准后的波长值和相应的吸光度值,以便后续参考和使用。
三、注意事项
1、避免污染:在测量过程中,应避免标准物质受到污染或损坏,以免影响校准结果的准确性。
2、定期校准:建议定期对紫外分光光度计进行波长校准,以确保其测量准确性。校准频率可根据仪器的使用情况和维护要求来确定。
3、专业操作:波长校准是一项专业性较强的工作,应由经过培训的专业人员来执行。非专业人员在进行校准时可能会遇到困难或导致校准失败。
通过选择合适的标准物质、检查仪器状态、预热仪器、测量标准物质、调整波长和记录数据等步骤,可以对紫外分光光度计进行准确的波长校准。同时,需要注意避免污染、定期校准和专业操作等事项,以确保校准结果的准确性和可靠性。